यदि रक्त का विश्लेषण। यह कैसे किया जाता है और एंजाइम इम्यूनोएसे क्या दिखाता है?एलिसा द्वारा रक्त के नमूनों की जांच
सिफलिस के लिए ट्रेपोनेमल परीक्षण। सामान्य विवरण।
सिफलिस के लिए नैदानिक परीक्षण करते समय, विभिन्न सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाएं: एग्लूटिनेशन, वर्षा, इम्यूनोफ्लोरेसेंस, पूरक निर्धारण, एंजाइम इम्यूनोएसे, आदि। ये सभी सीरोलॉजिकल रिएक्शन इंटरेक्शन पर आधारित हैं एंटीजन और एंटीबॉडी.
विशिष्ट सीरोलॉजिकल परीक्षणों को ट्रेपोनेमल कहा जाता है क्योंकि ये परीक्षण हल्के ट्रेपोनेमा या उनके एंटीजन का उपयोग करते हैं, जो कि ट्रेपोनेमल मूल के एंटीजन हैं।
ट्रेपोनेमल परीक्षणों का उद्देश्य सिफलिस के कारक एजेंट के एंटीजेनिक संरचनाओं के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी की पहचान करना है, यानी एंटीबॉडी विशेष रूप से टी के खिलाफ निर्देशित होती हैं।
पैलिडम, और ट्रेपोनिमा द्वारा क्षतिग्रस्त शरीर के ऊतकों के खिलाफ नहीं। आईजीएम वर्ग के विशिष्ट एंटीट्रेपोनेमल एंटीबॉडी का पता बीमारी के दूसरे सप्ताह के अंत में लगाया जा सकता है।
के रूप में गैर-ट्रेपोनेमल परीक्षण, ट्रेपोनेमल परीक्षण करते समय, एंटीजन-एंटीबॉडी प्रतिक्रिया का उपयोग किया जाता है। गैर-ट्रेपोनेमल परीक्षणों की तुलना में एंटीजन-एंटीबॉडी प्रतिक्रिया के परिणामों का संचालन और पता लगाने के लिए अधिक जटिल और महंगी विधियों का उपयोग किया जाता है।
सिफिलिटिक संक्रमण की समय पर और उच्च गुणवत्ता वाली पहचान वर्तमान में ट्रेपोनेमल परीक्षणों के व्यापक परिचय से जुड़ी है।
उपदंश की उपस्थिति की पुष्टि के लिए ट्रेपोनेमल परीक्षणों का उपयोग किया जाता है - उनका उपयोग गैर-ट्रेपोनेमल परीक्षणों के परिणामों की जांच के लिए किया जाता है, जो निदान के लिए विशेष रूप से आवश्यक है सिफलिस के छिपे हुए रूप. उपदंश का पता लगाने के लिए ट्रेपोनेमल परीक्षण का भी उपयोग किया जाता है प्रारम्भिक चरणजब गैर-ट्रेपोनेमल कार्डियोलिपिन परीक्षण(वासरमैन रिएक्शन, माइक्रोप्रेजर्वेशन रिएक्शन, आदि) नकारात्मक हैं।
ट्रेपोनेमल परीक्षण केवल सिफलिस के निदान के लिए उपयोग किए जाते हैं और इलाज की निगरानी के लिए उपयोग नहीं किए जाते हैं, क्योंकि कुछ रोगियों में सिफलिस के पूर्ण उपचार के बाद कई वर्षों तक ट्रेपोनेमल परीक्षण सकारात्मक रह सकते हैं।
हालांकि, ट्रेपोनेमल परीक्षण करते समय, कुछ अध्ययनों में हो सकता है झूठे सकारात्मक परिणामखासकर अगर रोगी को संक्रामक मोनोन्यूक्लिओसिस, संयोजी ऊतक रोग, कुष्ठ रोग या इंजेक्शन नशीली दवाओं की लत जैसी बीमारियां हैं।
नैदानिक विशिष्टता के संदर्भ में, ट्रेपोनेमल परीक्षण गैर-ट्रेपोनेमल परीक्षण के बराबर हैं, और नैदानिक संवेदनशीलता के संदर्भ में, वे श्रेष्ठ हैं।
झूठे सकारात्मक परिणामों के कारण
वासरमैन प्रतिक्रिया "तीव्र" और "पुरानी" झूठी सकारात्मक परिणाम निर्धारित कर सकती है। इसकी गंभीरता व्यक्ति की स्थिति में परिवर्तन की प्रकृति पर निर्भर करती है। आरडब्ल्यू ऐसे मामलों में अतिशयोक्ति का चरण दिखा सकता है:
- तीव्र चरण में संक्रामक रोग;
- दर्दनाक चोटें;
- हृद्पेशीय रोधगलन;
- परीक्षण से कुछ दिन पहले किसी भी टीके की शुरूआत;
- विषाक्त भोजन।
उपदंश के लिए परीक्षण के प्रकार
उपदंश के निदान में कुछ विशेषताएं हैं और यह अन्य जीवाणु संक्रमणों के निदान से भिन्न है। पेल ट्रेपोनिमा की जटिल संरचना और एंटीजेनिक गुण सीरोलॉजिकल परीक्षणों के परिणामों की व्याख्या में त्रुटियां पैदा करते हैं।
रोगियों के 3 मुख्य समूहों को सिफलिस के लिए रक्त परीक्षण की पेशकश की जाती है:
- 1 जनसंख्या समूहों की स्क्रीनिंग और रोगनिरोधी चिकित्सा परीक्षा (गर्भावस्था सहित, प्रसवपूर्व क्लिनिक में पंजीकरण, रोजगार और एक चिकित्सा पुस्तक का पंजीकरण, और इसी तरह)।
- 2 जोखिम समूहों में स्क्रीनिंग (सिफलिस से संक्रमित व्यक्ति के साथ असुरक्षित यौन संबंध, जबरन यौन संपर्क के बाद व्यक्ति, एचआईवी संक्रमित, और इसी तरह)।
- 3 लक्षणों वाले व्यक्ति या सिफिलिटिक संक्रमण होने का संदेह।
सभी प्रयोगशाला के तरीकेसशर्त रूप से प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष में विभाजित।
प्रत्यक्ष तरीके
- 1 डार्क फील्ड (डार्क फील्ड माइक्रोस्कोपी) में ट्रेपोनिमा पैलिडम की पहचान।
- 2 प्रायोगिक पशुओं का संक्रमण (प्रयोगशाला पशुओं में संवर्धन)।
- 3 पीसीआर (पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन)।
- 4 डीएनए जांच या न्यूक्लिक एसिड संकरण।
अप्रत्यक्ष तरीके
सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाएं पीले ट्रेपोनेमा (एजी के रूप में संक्षिप्त) के प्रतिजनों के लिए एंटीबॉडी (एटी के रूप में संक्षिप्त) का पता लगाने के आधार पर प्रयोगशाला नैदानिक तरीके हैं। वे निदान की पुष्टि करने के लिए आवश्यक हैं।
- 1 गैर-ट्रेपोनेमल परीक्षण:
- वासरमैन रिएक्शन (RSK);
- सूक्ष्म अवक्षेपण प्रतिक्रिया (MR, RMP) और इसके अनुरूप, जो नीचे दिए गए हैं;
- रैपिड प्लाज्मा रीगिन टेस्ट (आरपीआर, आरपीआर);
- लाल टोल्यूडीन और सीरम (ट्रस्ट) के साथ परीक्षण;
- यौन संचारित रोगों के अध्ययन के लिए प्रयोगशाला का गैर-ट्रेपोनेमल परीक्षण - वीडीआरएल।
- 2 ट्रेपोनेमल परीक्षण:
- ट्रेपोनिमा पैलिडम के स्थिरीकरण का आर-टियन - आरआईबीटी / आरआईटी;
- इम्यूनोफ्लोरेसेंस का आर-टियन - आरआईएफ, एफटीए (सीरा आरआईएफ-10, आरआईएफ-200, आरआईएफ-एबीएस का कमजोर पड़ना);
- निष्क्रिय रक्तगुल्म (RPHA, TRPGA, TPHA) का R-tion;
- एलिसा (एलिसा, ईआईए);
- इम्यूनोब्लॉटिंग।
चित्र 1 - सिफलिस सेरोडायग्नोसिस एल्गोरिथम
हिस्टोमॉर्फोलॉजिकल तरीके
सिफिलिटिक अभिव्यक्तियों के हिस्टोमोर्फोलॉजी की विशेषताओं की पहचान करने के लिए इन तरीकों को कम किया जाता है। कठोर चांसरे की संरचना की सूक्ष्मताओं पर ध्यान दिया जाता है।
हालाँकि, क्रमानुसार रोग का निदानऊतक विज्ञान का उपयोग कर संक्रमण बहुत मुश्किल है। हिस्टोमॉर्फोलॉजी का उपयोग अन्य प्रयोगशाला और नैदानिक परीक्षणों के साथ किया जाता है।
तरीकों नैदानिक अनुसंधानहर साल तेजी से सुधार हो रहा है। नई नैदानिक विधियों के विकास के साथ, उपदंश के लिए झूठी सकारात्मक प्रतिक्रिया कम आम होती जा रही है।
यदि आवश्यक हो, तो निदान में कई अलग-अलग तरीके शामिल हो सकते हैं - यह आपको सबसे विश्वसनीय परिणाम प्राप्त करने की अनुमति देता है।
गैर-ट्रेपोनेमल अनुसंधान के तरीके
इन तकनीकों का उद्देश्य उन प्रोटीनों की पहचान करना है जो पेल स्पाइरोचेट की गतिविधि के परिणामस्वरूप बनते हैं। उनका उद्देश्य रोगज़नक़ के "निशान" को निर्धारित करना है।
इस तरह के तरीकों में त्रुटि का अपेक्षाकृत उच्च प्रतिशत (10% तक) होता है। ऐसी तकनीकें गैर-विशिष्ट हैं, लेकिन एंटीबॉडी टिटर द्वारा संक्रमण की डिग्री निर्धारित करने की अनुमति देती हैं।
वासरमैन प्रतिक्रिया आरडब्ल्यू
पेल ट्रेपोनिमा का पता लगाने के लिए किया जाने वाला सबसे आम परीक्षण एक सीरोलॉजिकल रक्त परीक्षण है। वासरमैन प्रतिक्रिया आपको कुछ ही मिनटों में रोग की उपस्थिति निर्धारित करने की अनुमति देती है।
इसलिए, इस तकनीक का प्रयोग अक्सर प्रयोगशालाओं में किया जाता है - इसमें अधिक समय की आवश्यकता नहीं होती है और अपेक्षाकृत कम लागत होती है।
विश्लेषण करने के लिए, मस्तिष्कमेरु द्रव या रक्त का उपयोग किया जाता है। परीक्षण सामग्री एक उंगली से ली जा सकती है (यदि केवल एक विश्लेषण है) या एक नस से (यदि कई अध्ययनों की आवश्यकता है)।
विश्लेषण के परिणामस्वरूप, यह न केवल गलत सकारात्मक हो सकता है, बल्कि गलत नकारात्मक भी हो सकता है। यह निम्नलिखित परिस्थितियों में संभव है:
- संक्रमण का प्रारंभिक चरण, जब शरीर में ट्रेपोनिमा की संख्या अभी भी कम होती है;
- छूट के चरण में पुरानी बीमारी, जब एंटीबॉडी की संख्या कम हो जाती है।
रोग का पता लगाने के लिए विभिन्न तरीकों और बायोमटेरियल का उपयोग किया जाता है। प्रारंभिक अवस्था में, बैक्टीरियोस्कोपिक परीक्षण का उपयोग करके सिफलिस का निर्धारण किया जाता है।
माइक्रोस्कोप के तहत नमूनों की जांच की जाती है। डिवाइस आपको रोगज़नक़ के तनाव का पता लगाने की अनुमति देता है।
बाद में, सीरोलॉजिकल परीक्षण किए जाते हैं। उनके लिए धन्यवाद, नमूनों में रोग के प्रतिजन और एंटीबॉडी का पता लगाया जाता है।
यौन संक्रमण को निर्धारित करने के तरीकों को 2 श्रेणियों में विभाजित किया गया है:
- प्रत्यक्ष, एक रोगजनक सूक्ष्मजीव का खुलासा। इनमें शामिल हैं: डार्क-फील्ड माइक्रोस्कोपी, आरआईटी विश्लेषण (अनुसंधान के लिए जैव सामग्री के साथ खरगोशों का संक्रमण), पीसीआर विधि - पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन (इसकी मदद से रोगज़नक़ के आनुवंशिक तत्व पाए जाते हैं)।
- एक रोगज़नक़ के लिए एंटीबॉडी का अप्रत्यक्ष (सीरोलॉजिकल) पता लगाना। वे संक्रमण के जवाब में प्रतिरक्षा प्रणाली द्वारा निर्मित होते हैं।
सीरोलॉजिकल विधियों को 2 श्रेणियों में विभाजित किया गया है: ट्रेपोनेमल और गैर-ट्रेपोनेमल।
गैर-ट्रेपोनेमल, जिनमें शामिल हैं: टोल्यूडाइन रेड टेस्ट, सीएससी विश्लेषण, आरपीआर परीक्षण, आरएमपी एक्सप्रेस विधि द्वारा रक्त परीक्षण।
ट्रेपोनेमल, संयोजन: इम्युनोब्लॉटिंग, आरएसके परीक्षण, आरआईटी विश्लेषण, आरआईएफ अध्ययन, आरपीजीए परीक्षण, एलिसा विश्लेषण।
संक्रमण के लिए परीक्षणों की सूचनात्मकता अलग है। सिफलिस के लिए मुख्य प्रकार के परीक्षण अधिक बार किए जाते हैं, जिसमें सीरोलॉजिकल तरीके शामिल होते हैं। जिन रोगियों को परीक्षा की आवश्यकता होती है, उनके लिए डॉक्टर व्यक्तिगत रूप से परीक्षण निर्धारित करते हैं।
अनुसंधान के लिए बायोमटेरियल
पेल ट्रेपोनिमा की पहचान करने के लिए, एक रोगज़नक़ जो एक सर्पिल जैसा दिखता है और सिफलिस का कारण बनता है, नमूने लिए जाते हैं:
- नसयुक्त रक्त;
- शराब (रीढ़ की हड्डी की नहर से स्राव);
- लिम्फ नोड्स की सामग्री;
- अल्सर ऊतक।
यदि उपदंश का पता लगाने के लिए परीक्षण करना आवश्यक है, तो रक्त न केवल क्यूबिटल नस से लिया जाता है, बल्कि उंगली से भी लिया जाता है। बायोमटेरियल और शोध की विधि का विकल्प संक्रमण की गंभीरता और डायग्नोस्टिक सेंटर के उपकरण से प्रभावित होता है।
ट्रेपोनिमा का पता लगाने के लिए प्रयोगशाला परीक्षणों को सेरोडायग्नोसिस कहा जाता है। सिफलिस के सेरोडायग्नोसिस को पारंपरिक रूप से दो समूहों में विभाजित किया गया है:
- विशिष्ट विश्लेषण जो देते हैं सकारात्मक नमूनारोग ठीक होने के बाद भी;
- विशिष्ट समय पर कोई बीमारी होने पर परिणाम दिखाने वाले गैर-विशिष्ट परीक्षण।
सिफलिस की जांच को क्या कहते हैं? अध्ययन के आधार पर 2 समूहों में बांटा गया है:
विशिष्ट विश्लेषण:
- सिफलिस आरपीजीए, जो पैसिव एग्लूटीनेशन रिएक्शन या सिफलिस ट्रना के लिए खड़ा है, जो ट्रेपोनिमा पैलिडम हैमग्लुटिनेशन के रूप में अनुवाद करता है;
- आरआईएफ या इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया;
- RIT या ट्रेपोनिमा स्थिरीकरण प्रतिक्रिया;
- लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख;
- उपदंश या इम्युनोब्लॉट के लिए इम्युनोब्लॉट;
सबसे प्रसिद्ध ट्रेपोनेमल परीक्षण हैं:
- ट्रेपोनेमल एंटीजन (RSKt) के साथ पूरक फिक्सेशन रिएक्शन (वासरमैन रिएक्शन)।
- इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया (आरआईएफ; फ्लोरोसेंट ट्रेपोनेमल एंटीबॉडी, एफटीए)। इसका उपयोग कई संशोधनों में किया जाता है: RIF-200 (FTA-200); RIF-abs (FTA-abs; FTA-abs डबल स्टेनिंग; FTA-abs IgM; RIF-abs-IgM; 19S-IgM-FTA-abs); रिफ्ट्स - पूरे रक्त के साथ इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया।
- निष्क्रिय रक्तगुल्म परीक्षण (TPHA; ट्रेपोनिमा पैलिडम रक्तगुल्म परख, TPHA)।
- सिफलिस के कारक एजेंट (टीपीपीए, ट्रेपेनेमा पैलिडम पार्टिकल एग्लूटिनेशन एसे) के एंटीजन के साथ संवेदनशील जिलेटिन कणों की निष्क्रिय समूहन प्रतिक्रिया
- एंजाइम इम्यूनोएसे (एलिसा; एंजाइम लिन्स्ड इम्यूनोसॉर्बेंट परख, एलिसा)।
- IHL - इम्यूनोकेमिल्यूमिनिसेंट स्टडी (ICL; केमिलुमिनसेंस इम्यूनोएसेज़, CLIA)
- ट्रेपोनिमा पैलिडम इमोबिलाइजेशन रिएक्शन आरआईबीटी (आरआईटी), विदेशी साहित्य में टीपीआई (ट्रेपोनिमा पैलिडम इमोबिलाइजेशन टेस्ट)। में पिछले साल काकम से कम और केवल वैज्ञानिक उद्देश्यों और अनुसंधान प्रयोगशालाओं में उपयोग किया जाता है।
- इम्यूनोब्लोटिंग (आईबी; वेस्टर्न ब्लाट, लाइन ब्लाट)। एक नियम के रूप में, एक रैखिक इम्युनोब्लॉटिंग विधि का उपयोग किया जाता है, जो कि एंजाइम इम्यूनोसे का एक प्रकार है। इसका उपयोग दो संस्करणों में किया जाता है: सिफिलिस के कारक एजेंट को आईजीजी और आईजीएम एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए
आईजीएम, आईजीजी और कुल वर्गों के एंटीबॉडी के लिए निष्क्रिय रक्तगुल्म परीक्षण (आरपीएचए) और एंजाइम इम्यूनोएसे (एलिसा) सार्वभौमिक महत्व के हैं और स्क्रीनिंग और निदान की पुष्टि करने के लिए दोनों का उपयोग किया जाता है।
ये तकनीकें सरल और सस्ती हैं, उच्च पुनरुत्पादन क्षमता है, और स्वचालित हैं। एलिसा या टीपीएचए का उपयोग करते समय, प्रारंभिक परीक्षा की तरह पुन: विश्लेषण में उसी परीक्षण प्रणाली का उपयोग करना एक पूर्वापेक्षा है।
एफटीए (फ्लोरोसेंट ट्रेपोनेमल एंटीबॉडी, एफटीए) फ्लोरोक्रोम-लेबल एंटी-ह्यूमन आईजी सीरम का उपयोग करके फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोपी द्वारा एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स के दृश्य पर आधारित है।
आरआईएफ, एलिसा, इम्युनोब्लॉटिंग (आईबी) विधियां टी। पैलिडम एंटीजन के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी का पता लगाना संभव बनाती हैं (सिफिलिस के साथ, परीक्षण के परिणाम सकारात्मक हो जाते हैं) संक्रमण के क्षण से तीसरे सप्ताह से और पहले, आरपीएचए और आरआईबीटी - 7 से -आठवां सप्ताह।
विश्व अभ्यास में सबसे आम विशिष्ट ट्रेपोनेमल परीक्षणों में से, जो समूहन प्रतिक्रिया का उपयोग करते हैं, निम्नलिखित को सूचीबद्ध किया जा सकता है। टीपीएचए (ट्रेपोनेमा पैलिडम हेमग्लगुटिनेशन एसे, टीपीएचए) में, माइक्रोहेमग्लूटीनेशन एसे (ट्रेपोनेमा पैलिडम, एमएचए-टीपी के लिए माइक्रोहेमग्लुटिनेशन एसे), एक सकारात्मक परिणाम के साथ, ट्रेपोनेमल एंटीजन के साथ संवेदनशील (उपचारित) एरिथ्रोसाइट्स का एग्लूटीनेशन एंटीट्रेपोनेमल एंटीबॉडी की उपस्थिति में होता है। टीपीआरए (ट्रेपोनेमा पैलिडम पार्टिकल एग्लूटिनेशन) परीक्षण में वाहक के रूप में लेटेक्स या जिलेटिन कणों का उपयोग कुछ रोगियों के सीरा द्वारा एरिथ्रोसाइट लाइसिस (उनकी झिल्ली के विनाश के कारण एरिथ्रोसाइट्स का विनाश) के मामले में तनाव परीक्षण के उपयोग की अनुमति देता है। , और अभिकर्मकों को स्थिरता भी देता है।
ट्रेपोनेमल परीक्षण
| एंटीजन | पकड़ने की प्रणाली | परीक्षा |
|
लाइव रोगजनक ट्रेपोनेमा |
लाइव ट्रेपोनिमा का निलंबन |
RIT, RIBT (ट्रेपोनिमा पैलिडम स्थिरीकरण प्रतिक्रिया) |
| बरकरार ट्रेपोनेमा | ट्रेपोनिमा चश्मे पर तय किया गया |
आरआईएफ (इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया), आरआईएफ-एबीएस (अवशोषण के साथ आरआईएफ), आरआईएफ-सी, आरआईएफ के साथ केशिका रक्तउंगली आदि से |
| Treponemas अल्ट्रासाउंड द्वारा साफ और नष्ट कर दिया | एरिथ्रोसाइट्स के साथ संबद्ध | RPHA (निष्क्रिय hemagglutination प्रतिक्रिया) |
| जिलेटिन कणों के साथ संबद्ध | कण समूहन परीक्षण (TPPA) | |
| एलिसा | ||
| immunoblotting | ||
| पुनः संयोजक | माइक्रोप्लेट कुओं की सतह से जुड़ा हुआ है | पुनः संयोजक एलिसा |
|
पॉलीएक्रिलामाइड जेल वैद्युतकणसंचलन द्वारा प्रोटीन को अलग किया जाता है और पश्चिमी सोख्ता द्वारा झिल्ली में स्थानांतरित किया जाता है |
पुनः संयोजक एंटीजन के साथ इम्यूनोब्लॉटिंग | |
| लेटेक्स कणों के साथ बंधे | लेटेक्स एग्लूटिनेशन |
प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष तरीकों से रोगों का निदान संभव है। एक प्रत्यक्ष विधि द्वारा ही पेल ट्रेपोनिमा का पता लगाया जाता है।
अप्रत्यक्ष विधि स्पाइरोकेट्स के लिए एंटीबॉडी का पता लगाती है। यदि एंटीबॉडी पाए जाते हैं, तो यह शरीर में एक स्पाइरोचेट की उपस्थिति की पुष्टि करता है।
अप्रत्यक्ष निदान विधियों में सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाएं शामिल हैं, जिनके अध्ययन का उद्देश्य रक्त सीरम है।
एंटीजन के साथ उनके संपर्क के दौरान एंटीबॉडी का पता लगाया जा सकता है। इसलिए, दिए गए प्रतिजन वाले पदार्थों का उपयोग सीरोलॉजिकल प्रतिक्रिया करने के लिए किया जाता है। इस प्रतिजन के प्रकार के अनुसार, प्रतिक्रियाओं को ट्रेपोनेमल और गैर-ट्रेपोनेमल में विभाजित किया जाता है:
- ट्रेपोनेमा प्रतिजनों के एंटीबॉडी का पता लगाने के साथ ट्रेपोनेमल प्रतिक्रिया होती है।
- गैर-ट्रेपोनेमल प्रतिक्रियाएं वे हैं जो मानव शरीर के नष्ट हो चुके ट्रेपोनेमा या कोशिकाओं के लिपोप्रोटीन के एंटीबॉडी का पता लगाती हैं।
महत्वपूर्ण! चूंकि बाद वाले जानवरों के ऊतकों के लिपोप्रोटीन से बहुत अलग नहीं हैं, सिफलिस के विश्लेषण का परिणाम गलत सकारात्मक हो सकता है। केवल एक सकारात्मक ट्रेपोनेमल प्रतिक्रिया ही रोग के निदान की पुष्टि कर सकती है।
हम सिफलिस की पुष्टि करते हैं या उसे खारिज करते हैं: इतिहास, लक्षण, परीक्षण
केवल एक त्वचा विशेषज्ञ निदान की पुष्टि या बहिष्करण कर सकता है। एक मूत्र रोग विशेषज्ञ या स्त्री रोग विशेषज्ञ केवल बाहरी संकेतों से रोग पर संदेह कर सकते हैं। और फिर उन्हें आगे की जांच, उपचार और निगरानी के लिए रोगी को त्वचा विशेषज्ञ के पास भेजना चाहिए।
"सिफलिस" का निदान निम्नलिखित संकेतों के संयोजन पर आधारित है:
- बाहरी अभिव्यक्तियों और लक्षणों की उपस्थिति या अनुपस्थिति में।
- कम से कम दो के परिणामों पर प्रयोगशाला अनुसंधान: गैर-ट्रेपोनेमल (आरएमपी, या आरडब्ल्यू, या आरपीआर) और ट्रेपोनेमल (आरपीएचए या एलिसा) परीक्षण।
- डेटा पर कि क्या पहले सिफलिस था, और क्या इसका इलाज पहले ही हो चुका है।
अगर लक्षण हैं
सिफिलिस के लिए मुख्य परीक्षण - आरपीआर और आरपीएचए- सबसे स्पष्ट और उचित निदान माना जाता है जब वहाँ होते हैं नैदानिक लक्षणऔर दो विश्लेषणों के परिणामों की पुष्टि करना: आरपीआर (या आरडब्ल्यू, आरएमपी) और आरपीजीए (या एलिसा)।
- यदि, लक्षणों की उपस्थिति में, परीक्षण के परिणाम अलग हो जाते हैं, और आरपीआर नकारात्मक है, और टीपीएचए (या एलिसा) सकारात्मक है, तो एक अतिरिक्त ट्रेपोनेमल परीक्षण किया जाता है - एलिसा (या आरपीएचए, यदि एलिसा पहले किया गया था)। एक सकारात्मक अतिरिक्त विश्लेषण के मामले में, निदान को सिद्ध माना जाता है और उपचार किया जाता है, एक नकारात्मक के मामले में, रक्त एक विशेषज्ञ प्रयोगशाला में भेजा जाता है।
सकारात्मक एलिसा/टीपीएचए के साथ नकारात्मक आरपीआर आमतौर पर बाद की अवधि में होता है। फिर, संक्रमण की उपस्थिति के लिए मस्तिष्कमेरु द्रव (आरआईएफ-सी, आरआईटी) की आवश्यक रूप से जांच की जाती है। - विपरीत स्थिति, जब आरपीआर सकारात्मक है, और टीपीएचए नकारात्मक (या संदिग्ध) है, अत्यंत दुर्लभ है। यह एक कठिन चांसरे की उपस्थिति के साथ-साथ प्रतिरक्षा "प्रोज़ोन" (एंटीबॉडी की अत्यधिक मात्रा) के दौरान द्वितीयक अवधि में पहले 3-4 सप्ताह में संभव है। इस मामले में, विश्लेषण को दोहराने की सिफारिश की जाती है।
अगर कोई बाहरी संकेत नहीं हैं
तब निदान अधिक कठिन हो जाता है। यहां, डॉक्टर केवल चल रहे या पहले अनुपचारित उपचार के बारे में परीक्षणों और सूचनाओं पर भरोसा करते हैं।
इस मामले में विकल्प:
- यदि गैर-ट्रेपोनेमल (आरएमपी / आरडब्ल्यू / आरपीआर में से एक) और ट्रेपोनेमल परीक्षण (आरपीएचए / एलिसा) सकारात्मक हैं, तो एक अतिरिक्त वैकल्पिक ट्रेपोनेमल परीक्षण किया जाता है (एलिसा यदि पहला परीक्षण आरपीएचए था, और इसके विपरीत - आरपीएचए यदि कोई एलिसा था ). यदि परीक्षण नकारात्मक हो जाता है, तो रोगी का रक्त विशेषज्ञ प्रयोगशाला में भेजा जाता है और अतिरिक्त परीक्षण किए जाते हैं। यदि दूसरा ट्रेपोनेमल परीक्षण सकारात्मक हो जाता है, तो एक निदान किया जाता है: "छिपी हुई उपदंश।" उपचार के बाद कुछ समय के लिए यह स्थिति देखी जा सकती है। यदि रोगी का पहले इलाज किया गया है, तो निदान की पुष्टि करने के लिए, I gM पर एक अतिरिक्त अध्ययन किया जाता है। यदि परिणाम सकारात्मक हैं, तो निदान की पुष्टि की जाती है, लेकिन अध्ययन को अभी भी 2 सप्ताह के बाद दोहराया जाने की सिफारिश की जाती है। यदि परिणाम नकारात्मक हैं, तो सिफलिस का खंडन किया जाता है।
- यदि गैर-ट्रेपोनेमल परीक्षण (आरएमपी / आरडब्ल्यू / आरपीआर) नकारात्मक है, और ट्रेपोनेमल परीक्षण (आरपीएचए / एलिसा) सकारात्मक है, तो स्थिति का मूल्यांकन "देर से उपदंश" या "उपदंश की अनुपस्थिति" के रूप में किया जा सकता है यदि रोगी को पहले पूरा इलाज मिला। इन दो अवस्थाओं के बीच अंतर करने के लिए, I gM के लिए एक अतिरिक्त परीक्षण किया जाता है (ELISA I gM, RIF-abs-I gM, Immunoblotting-I gM)। यदि रक्त में I gM है, तो "लेट सिफलिस" डालें और इलाज करें। यदि नहीं, तो रोगी को स्वस्थ माना जाता है।
- यदि आरपीआर (या आरडब्ल्यू / आरएमपी) सकारात्मक है, आरपीएचए सकारात्मक है, और एलिसा नकारात्मक है (या इसके विपरीत: आरपीएचए "-" है और एलिसा "+") है, तो परीक्षण के परिणाम संदिग्ध हैं और रक्त भेजने की सिफारिश की जाती है। एक विशेषज्ञ प्रयोगशाला में या वैकल्पिक परीक्षण (आरआईएफ, इम्युनोब्लॉटिंग) करें।
- यदि गैर-ट्रेपोनेमल परीक्षण (पीएमपी/आरडब्ल्यू/आरपीआर) सकारात्मक है, और ट्रेपोनेमल परीक्षण (आरपीएचए/एलिसा) नकारात्मक है, तो एक अतिरिक्त ट्रेपोनेमल परीक्षण (एलिसा/आरपीएचए) किया जाता है। यदि यह सकारात्मक परिणाम देता है, तो रक्त को विशेषज्ञ प्रयोगशाला में भेजा जाता है। यदि नकारात्मक है, तो निदान का खंडन किया जाता है, और गैर-ट्रेपोनेमल परीक्षण के परिणाम को गलत सकारात्मक माना जाता है।
प्रयोगशाला निदान विधियों का वर्गीकरण
सीरोलॉजिकल डायग्नोसिस डॉक्टर को सिफिलिस वाले रोगी के शरीर में एंटीबॉडी के गठन की गतिशीलता का अध्ययन करने में मदद करता है शुरुआती अवस्थारोग, उपचार की अवधि के दौरान और उसके पूरा होने के बाद, एक रोगी में रोग की पुनरावृत्ति या पुन: संक्रमण (पुनर्संक्रमण) के मुद्दे को हल करने के लिए, सामूहिक चिकित्सा स्थितियों के तहत उपदंश का निदान करने के लिए।
पेल ट्रेपोनिमा आईजीएम के एंटीबॉडी
संक्रमण के बाद आईजीएम एंटीबॉडी सबसे पहले बनते हैं। संक्रमण के बाद दूसरे सप्ताह से सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं का उपयोग करके उनका पता लगाना शुरू हो जाता है।
बीमारी के 6-9 सप्ताह में इनकी संख्या अधिकतम हो जाती है। यदि रोगी का इलाज नहीं किया गया है, तो एंटीबॉडी छह महीने के बाद गायब हो जाती हैं।
आईजीएम एंटीबॉडी 1-2 महीने के बाद गायब हो जाते हैं। प्रारंभिक उपदंश के उपचार के बाद, 3-6 महीने के बाद।
देर से उपदंश के उपचार के बाद। यदि उनकी वृद्धि दर्ज की जाती है, तो यह उपदंश के पुनरावर्तन का संकेत है या पुन: संक्रमण का संकेत देता है।
आईजीएम अणु बड़े होते हैं और प्लेसेंटा से भ्रूण तक नहीं जाते हैं।
पेल ट्रेपोनिमा आईजीजी के लिए एंटीबॉडी
एंटीबॉडी इम्युनोग्लोबुलिन आईजीजी संक्रमण के क्षण से पहले महीने (चौथे सप्ताह पर) के अंत में दिखाई देते हैं। उनका अनुमापांक IgM अनुमापांक से अधिक होता है। इलाज के बाद भी आईजीजी लंबे समय तक बना रहता है।
गैर विशिष्ट एंटीबॉडी
कई सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाएं हैं। यह पेल ट्रेपोनिमा की एंटीजेनिक बहुलता के कारण है।
सिफलिस के विभिन्न चरणों में एक बीमार व्यक्ति के रक्त सीरम में, विशिष्ट के अलावा, कुछ गैर-विशिष्ट एंटीबॉडी बनते हैं - एग्लूटीनिन, पूरक-फिक्सिंग, इमोबिलिसिन, एंटीबॉडी जो प्रतिरक्षा प्रतिदीप्ति, प्रीसिपिटिन आदि का कारण बनते हैं।
निरर्थक एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए सीरोलॉजिकल परीक्षणों में सापेक्ष विशिष्टता होती है, इसलिए, नैदानिक त्रुटियों से बचने के लिए, किसी को एक नहीं, बल्कि सीरोलॉजिकल टेस्ट (सीएसआर) का एक जटिल उपयोग करना चाहिए।
उपदंश के लिए गलत सकारात्मक परीक्षण
कार्डियोलिपिन एंटीजन के खिलाफ मानव रक्त में उत्पन्न होने वाले रीगिन एंटीबॉडीज न केवल सिफलिस में, बल्कि अन्य बीमारियों में भी पंजीकृत हैं: कोलेजनोसिस, हेपेटाइटिस, किडनी रोग, थायरोटॉक्सिकोसिस, कैंसर, संक्रामक रोग (कुष्ठ रोग, तपेदिक, ब्रुसेलोसिस, मलेरिया, टाइफस) ., स्कार्लेट ज्वर), गर्भावस्था और मासिक धर्म के दौरान, वसायुक्त भोजन और शराब लेने पर।
इम्यूनोलॉजिकल कॉम्प्लेक्स जैसे जैविक रूप से सक्रिय पदार्थों की सामग्री के स्तर को निर्धारित करने के लिए, एक विशेष प्रयोगशाला अध्ययन की आवश्यकता होती है। यदि एक हेमेटोलॉजिकल, संक्रामक, या ऑटोम्यून्यून बीमारी का संदेह है, तो विशेषज्ञ एलिसा के लिए रक्त परीक्षण निर्धारित करते हैं। लेख के दौरान, हम इस बात पर विचार करेंगे कि यह क्या है, इसकी तैयारी कैसे करें, यह क्या दिखाता है और इसे स्वयं कैसे समझें।
यह किस प्रकार का अध्ययन है - एलिसा के लिए रक्त परीक्षण? संक्षिप्त नाम एंजाइम इम्यूनोसे के लिए है, जो विभिन्न जैविक रूप से सक्रिय पदार्थों की मात्रात्मक और गुणात्मक सामग्री के साथ-साथ जैविक सामग्री में एंटीबॉडी और एंटीजन को निर्धारित करता है।
एंजाइम इम्यूनोएसे में क्या प्रयोग किया जाता है:
- मस्तिष्कमेरु द्रव;
- मूत्रमार्ग का बलगम, ग्रीवा नहर;
- उल्बीय तरल पदार्थ;
- संतुष्ट नेत्रकाचाभ द्रव.
एंजाइम इम्यूनोएसे यौन संचारित रोगों, संक्रामक और ऑन्कोलॉजिकल प्रक्रियाओं के निदान के लिए निर्धारित है, एलर्जी, अंतःस्रावी और प्रजनन प्रणाली के काम में विकार, ऑटोइम्यून और इम्युनोडेफिशिएंसी रोग, साथ ही कुछ गुर्दे के विकास के जोखिम का आकलन करने के लिए।
गर्भावस्था के दौरान एलिसा के लिए एक रक्त परीक्षण प्रारंभिक अवस्था में प्रारंभिक पहचान, विकासात्मक विकारों और उनकी गतिशीलता को नियंत्रित करने के उद्देश्य से निर्धारित किया जाता है। इसके अलावा, एलिसा विश्लेषण आपको एंटीबॉडी के स्तर को नियंत्रित करने की अनुमति देता है जो एक बच्चे में गंभीर न्यूरोलॉजिकल विकारों के विकास को भड़का सकता है, जिससे न केवल गर्भावस्था के दौरान, बल्कि प्रसव के दौरान भी जटिलताओं के विकास को रोका जा सकता है।
यह पहचान की गई समस्याओं के लिए पहले से प्रतिक्रिया करना संभव बनाता है और मां और उसके बच्चे दोनों के स्वास्थ्य में काफी सुधार करता है।
रक्त एलिसा के लाभों में शामिल हैं:
- संवेदनशीलता की उच्च (90% तक) डिग्री;
- रोग के चरण के एक साथ निर्धारण के साथ शीघ्र निदान की संभावना;
- अभिकर्मकों की कम लागत, और, परिणामस्वरूप, उपलब्धता;
- अनुसंधान के लिए सामग्री की न्यूनतम मात्रा;
- प्राप्ति की न्यूनतम शर्तें;
- अभिकर्मकों के दीर्घकालिक भंडारण की संभावना;
- रोग प्रक्रिया के विकास की गतिशीलता को नियंत्रित करने की क्षमता।
टेस्ट सिस्टम एंजाइम इम्यूनोसे के विपक्ष:
- रोग के कारक एजेंट को निर्दिष्ट करना असंभव है, प्रयोगशाला में उन्हें केवल एक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया प्राप्त होती है
- एक गलत परिणाम प्राप्त करने की संभावना (बहुत ही दुर्लभ मामलों में, मुख्य रूप से गर्भधारण की अवधि के दौरान)।
तैयारी
इस प्रकार के रक्त परीक्षण का सिद्धांत मानव शरीर में विशिष्ट एंटीबॉडी के गठन पर आधारित होता है जब एंटीजन इसमें प्रवेश करते हैं, अर्थात विदेशी एजेंट जो किसी विशेष बीमारी के विकास का कारण बनते हैं। उनकी बातचीत के परिणामस्वरूप, "एंटीजन-एंटीबॉडी" कॉम्प्लेक्स बनते हैं, जो एंजाइम इम्यूनोसे के कार्यान्वयन में शोध के अधीन होते हैं।
इस संबंध में, इन परिसरों को प्रभावित नहीं करने के लिए और तदनुसार, प्राप्त परिणामों की विश्वसनीयता, एलिसा के लिए रक्त परीक्षण और अन्य जैविक सामग्री के लिए कुछ तैयारी की आवश्यकता होती है।
साथ ही, प्रस्तावित परीक्षा से 14 दिन पहले, विशिष्ट उपचार निलंबित कर दिया जाता है और जीवाणुरोधी, एंटीवायरल का उपयोग किया जाता है दवाइयाँरुक जाता है।
एलिसा के लिए रक्त एक नस से लिया जाता है। रक्त के नमूने के तुरंत पहले, सीमा शारीरिक व्यायामऔर धूम्रपान और शराब पीने से बचें।
एंजाइम इम्यूनोएसे के संचालन के लिए कई तकनीकें और विधियाँ हैं: प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष विधि, प्रतिस्पर्धी और अवरोधन विधि।
एलिसा पर रक्त (कोई अन्य जैविक सामग्री) की परीक्षा का आधार एक एल्गोरिदम है जिसमें दो प्रतिक्रियाओं के कार्यान्वयन में शामिल होता है - प्रतिरक्षा और एंजाइमेटिक।
पहले के दौरान, पैथोलॉजिकल एजेंट अध्ययन के लिए ली गई जैविक सामग्री की कोशिकाओं के सुरक्षात्मक तत्वों से जुड़ते हैं। एक एंटीजन-एंटीबॉडी इम्यून कॉम्प्लेक्स बनता है। यह इस तरह दिख रहा है। एंटीजन बिल्कुल सभी कोशिकाओं की सतह पर मौजूद होते हैं।
जब विदेशी कोशिकाएं शरीर में प्रवेश करती हैं, तो उन्हें प्रतिरक्षा कोशिकाओं (जिनकी सतहों पर एंटीबॉडी स्थित हैं) द्वारा कब्जा कर लिया जाता है, जो नई आने वाली कोशिकाओं की सतह से एंटीजन डेटा की तुलना अपनी "मेमोरी" में संग्रहीत जानकारी से करती हैं। इन आंकड़ों के बीच विसंगति के मामले में, शरीर के सुरक्षात्मक कार्य, जो एक प्रतिरक्षा परिसर के गठन में शामिल हैं, शामिल हैं।
उसके बाद, एक एंजाइमी प्रतिक्रिया की जाती है, जो पिछली प्रतिक्रिया के परिणामों की कल्पना करती है। इसका सिद्धांत पदार्थ के एक से दूसरे में परिवर्तन पर आधारित है। सामग्री की प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के दौरान बनने वाले प्रत्येक प्रकार के एलिसा के लिए, एक निश्चित एंजाइम होता है, जिसके प्रसंस्करण का उपयोग विदेशी एजेंट की एकाग्रता (समाधान के धुंधला होने की तीव्रता से) को निर्धारित करने के लिए किया जाता है।
डिक्रिप्शन
एलिसा के लिए रक्त परीक्षण के लिए धन्यवाद, प्रयोगशाला सहायक ए, जी और एम निर्धारित करते हैं। एलिसा के लिए रक्त (अन्य जैविक कच्चे माल) के अध्ययन में एक सकारात्मक परिणाम न केवल निदान करना संभव बनाता है, बल्कि रोग का चरण भी , साथ ही इसके पाठ्यक्रम की प्रकृति (तीव्र या जीर्ण)।
रोगी के शरीर में एक रोग प्रक्रिया की उपस्थिति में ये इम्युनोग्लोबुलिन रोग के विभिन्न अवधियों में बनते हैं:
- इम्युनोग्लोबुलिन एम, आईजीएम- रोग की शुरुआत के पांच दिन बाद बनते हैं और 1.5 महीने तक रक्त में रहते हैं, जिसके बाद वे गायब हो जाते हैं। आईजीएम का पता लगाना शरीर में एक तीव्र प्राथमिक रोग प्रक्रिया की उपस्थिति और बढ़े हुए चिकित्सीय हस्तक्षेप की आवश्यकता को इंगित करता है।
- इम्युनोग्लोबुलिन जी, आईजीजी- संक्रमण के चार सप्ताह बाद होते हैं, शरीर में उनकी मौजूदगी का कई महीनों तक पता लगाया जा सकता है। आईजीजी का पता लगाना किसी व्यक्ति की पिछली बीमारी के इतिहास में उपस्थिति को इंगित करता है। उनकी सामग्री में वृद्धि भी पुन: संक्रमण का संकेत दे सकती है।
- इम्युनोग्लोबुलिन ए, आईजीए- संक्रमण के समय दिखाई देते हैं और चार सप्ताह तक शरीर में मौजूद रहते हैं। उनकी सामग्री में कमी वसूली की शुरुआत का संकेत देती है। व्यक्ति के उपचार के बाद और ठीक होने के बाद फिर से विश्लेषण में उपस्थिति, रोग के संक्रमण को इंगित करता है जीर्ण रूप. एलिसा के परिणामों में IgA और IgG का एक साथ पता लगाना भी शरीर में एक पुरानी प्रक्रिया की उपस्थिति का संकेत देता है।
यह भी ध्यान दिया जाना चाहिए कि एक साथ उपस्थिति में आईजीजी परखऔर आईजीएम इंगित करता है कि पुरानी प्रक्रिया खराब हो गई है और रोगी को इलाज शुरू करने की जरूरत है। यदि परीक्षा के दौरान किसी भी इम्युनोग्लोबुलिन का पता नहीं चला, तो इसका मतलब प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया की अनुपस्थिति है।
उपलब्ध नैदानिक तरीकों की सूची हाल के दशकों में तेजी से विस्तार कर रही है, निदानकर्ता पिछले सभी विश्लेषणों के लाभों को नए तरीकों से संयोजित करने का प्रयास कर रहे हैं, जिससे उनकी सभी पिछली कमियों से छुटकारा मिल रहा है।
हाल ही में, नैदानिक प्रक्रियाओं की सूची में अधिक से अधिक बार, एंजाइम इम्यूनोसे प्रकट होता है - एक आधुनिक और काफी नया परीक्षण, जो सामान्य व्यक्ति के लिए बहुत कम ज्ञात है जो दवा से संबंधित नहीं है। फिर भी, यह तकनीक योग्य चिकित्सा कर्मचारियों के बीच तेजी से अपने अनुयायियों के रैंक की भरपाई कर रही है। यह क्या है और किन मामलों में इसका उपयोग किया जाना चाहिए, आप इसकी विशेषताओं और मुख्य विशेषताओं से खुद को परिचित करके इसका पता लगाने की कोशिश कर सकते हैं।
एंजाइम इम्यूनोएसे एंटीजन-एंटीबॉडी आणविक प्रतिक्रिया पर आधारित एक सहायक प्रयोगशाला तकनीक है, जो जैविक सामग्री (अनुसंधान के लिए नमूने) में विशिष्ट प्रोटीन का पता लगाना संभव बनाती है। ऐसे प्रोटीन एंजाइम, विभिन्न सूक्ष्मजीव (वायरस, बैक्टीरिया, कवक), प्रोटोजोआ आदि हो सकते हैं।
विधि की खोज के बाद, इसे एलिसा परीक्षण नाम दिया गया, जो खोजकर्ताओं के नाम से संबंधित नहीं है, लेकिन अंग्रेजी संस्करण में पूर्ण नाम का संक्षिप्त नाम है - एंजाइम-लिंक्ड इम्यूनोसॉर्बेंट परख। दुनिया भर के डॉक्टर इस नाम का इस्तेमाल करते हैं, रूसी भाषी देशों के कुछ डॉक्टर भी इस प्रकार के अध्ययन को कहते हैं।
विधि का मुख्य सिद्धांत आणविक प्रतिक्रिया "एंटीजन-एंटीबॉडी" है।
एंटीजन कोई भी विदेशी अणु है जो एक रोगजनक सूक्ष्म जीव के हिस्से के रूप में मानव शरीर में प्रवेश करता है। एंटीजन आमतौर पर प्रोटीन अणु होते हैं। सूक्ष्मजीवों के अलावा, ऐसे "अजनबी" किसी और के रक्त की कोशिकाएं हो सकती हैं जो समूह या आरएच कारक से मेल नहीं खाती हैं।
शरीर में ऐसे प्रतिजन के प्रवेश के जवाब में, एक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया शुरू की जाती है, जिसका उद्देश्य किसी भी विदेशी अणुओं से रक्षा करना है। यह विशेष एजेंटों के संश्लेषण के कारण होता है प्रतिरक्षा तंत्र- एंटीबॉडी (इम्युनोग्लोबुलिन)। प्रत्येक एंटीबॉडी केवल एक निश्चित एंटीजन तक पहुंचता है, और रोगजनक "बाहरी" को बेअसर करता है, इसे एक ही परिसर में बांधता है। यह ऐसे बंधन की प्रक्रिया है जिसे एंटीजन-एंटीबॉडी प्रतिक्रिया कहा जाता है।
एंटीबॉडी के प्रकार
सभी एंटीबॉडी (इम्युनोग्लोबुलिन) को 5 प्रकारों में विभाजित किया जाता है, जो इस बात पर निर्भर करता है कि वे प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के किस चरण में दिखाई देते हैं:
एलिसा डायग्नोस्टिक्स के लिए, इम्यूनोग्लोबुलिन आईजीजी, आईजीएम और आईजीए के स्तर अक्सर महत्वपूर्ण होते हैं। उनके क्रेडिट से, आप यह पता लगा सकते हैं कि क्या किसी व्यक्ति को पहले कोई बीमारी हुई है या हाल ही में संक्रमित हो गया है, क्या उसने प्रतिरक्षा विकसित की है या उसका शरीर पैथोलॉजी के प्रति रक्षाहीन है।
एंजाइम इम्यूनोएसे के फायदे और नुकसान
फिलहाल, एलिसा सबसे सटीक और संवेदनशील तरीकों में से एक है। यह चिकित्सा के विभिन्न क्षेत्रों में विशेषज्ञों द्वारा अपनाया गया है और इसके दायरे का विस्तार जारी है।
विधि के लाभ
- प्राप्त आंकड़ों की उच्च सटीकता।
- संवेदनशीलता (आपको नमूने में रोगज़नक़ की न्यूनतम उपस्थिति के साथ भी आवश्यक पदार्थ का पता लगाने की अनुमति देता है)।
- रोग के पहले दिनों में या ऊष्मायन अवधि में निदान की संभावना।
- समान सटीकता के अन्य तरीकों की तुलना में डेटा अधिग्रहण की गति।
- प्रक्रिया का उच्च स्वचालन और न्यूनतम मानव भागीदारी, जो कलाकार की त्रुटि को कम करती है।
- पैथोलॉजिकल प्रक्रिया के चरण और चयनित चिकित्सा की प्रभावशीलता पर डेटा प्राप्त करना।
- सामग्री के चयन में दर्द रहित और कम आक्रामकता।
विधि के नुकसान
- ज्यादातर मामलों में, यह आपको रोगजनक एजेंट के लिए शरीर की प्रतिक्रिया निर्धारित करने की अनुमति देता है, न कि स्वयं रोगज़नक़।
- अध्ययन से पहले, संदिग्ध बीमारी का सटीक पता होना चाहिए, क्योंकि परीक्षण अत्यधिक विशिष्ट होता है।
- तकनीकी मुद्दों, स्वागत के कारण झूठे संकेतकों की संभावना दवाइयाँ, रोगी के शरीर में कई पुरानी बीमारियों या चयापचय संबंधी विकारों की एक साथ उपस्थिति।
- परिणामों की व्याख्या केवल एक उच्च योग्य विशेषज्ञ द्वारा की जानी चाहिए, क्योंकि प्राप्त आंकड़ों की व्याख्या करने के लिए, किसी विशेष क्षेत्र में विशेष प्रशिक्षण और चिकित्सा ज्ञान का एक बड़ा भंडार होना आवश्यक है।
- एलिसा एक दुर्लभ विश्लेषण है, इसलिए यह सभी नैदानिक प्रयोगशालाओं में नहीं किया जाता है।
- विधि काफी महंगी है, क्योंकि अभिकर्मकों के अलावा, प्रयोगशाला में कई महंगे उपकरण और विशेष संस्थानों में उत्पादित एंटीजन के नमूने होने चाहिए।
एंजाइम इम्यूनोएसे का उपयोग कब किया जाता है?
एंजाइम इम्यूनोसे की नियुक्ति के लिए संकेतों की पूरी सूची बहुत विस्तृत है, इसमें दवा की लगभग सभी शाखाएँ शामिल हैं।
सबसे अधिक बार, एलिसा का उपयोग ऐसे उद्देश्यों के लिए किया जाता है:
- का पता लगाने संक्रामक रोग;
- यौन रोगों का निदान;
- प्रतिरक्षा स्थिति या व्यक्तिगत ऑटोइम्यून बीमारियों का निर्धारण;
- ट्यूमर मार्करों की पहचान;
- हार्मोन की परिभाषा
संक्रामक और के मामले में वायरल रोगतकनीक निम्नलिखित विकृति की पहचान करने की अनुमति देती है:
इसके अलावा, एलिसा आपको दिल का दौरा जल्दी और प्रभावी ढंग से निर्धारित करने, शरीर की प्रजनन क्षमता का आकलन करने, एलर्जी, इसके स्रोत आदि की पहचान करने की अनुमति देता है।
एलिसा तकनीक का उपयोग नई दवाओं के विकास में नैदानिक परीक्षण करने और मानव शरीर पर उनके प्रभाव का आकलन करने के लिए किया जाता है।
अनुसंधान के लिए नमूने के प्रकार और उनके चयन के तरीके
अक्सर, एंजाइम इम्यूनोएसे के लिए परीक्षण सामग्री रक्त होती है, जिसे रोगी की क्यूबिटल नस से लिया जाता है। नमूना खाली पेट लिया जाता है, मुख्यतः सुबह में। रक्त से चयन के बाद, उन गठित कोशिकाओं को अलग कर दिया जाता है जो अध्ययन में बाधा डालती हैं और हटा दी जाती हैं, केवल सीरम को छोड़कर।
जननांगों के संक्रमण का निदान करते समय, जननांग अंगों के श्लेष्म ऊतकों से स्मीयर, मूत्रमार्ग या गर्भाशय ग्रीवा से बलगम, मलाशय से नमूने, कटाव से खरोंच या कमर के क्षेत्र में अल्सर और शरीर के अन्य हिस्सों से अक्सर सामग्री बन जाती है। स्मीयरों को मौखिक गुहा से, साथ ही नासॉफरीनक्स से भी लिया जा सकता है।
कभी-कभी एमनियोटिक द्रव की स्थिति निर्धारित करने के लिए गर्भावस्था के दौरान प्रसूति और स्त्री रोग अभ्यास में एंजाइम इम्यूनोसे का उपयोग किया जाता है। इस मामले में, एमनियोटिक द्रव नमूना बन जाता है। ऐसा करने के लिए, एक लंबी सुई से भ्रूण के मूत्राशय में छेद करके थोड़ी मात्रा में तरल पदार्थ लिया जाता है। संभावित जोखिमों को कम करने के लिए सभी जोड़तोड़ एक बाँझ उपकरण के साथ किए जाते हैं।
अक्सर सामग्री सेरेब्रोस्पाइनल या सीरस द्रव बन जाती है। यह स्थानीय संज्ञाहरण के साथ होता है, जिसे इंजेक्ट किया जाता है।
निर्दिष्ट करें कि एंजाइम इम्यूनोएसे के लिए किस प्रकार की सामग्री की आवश्यकता है, जो विशेषज्ञ अध्ययन के लिए भेजता है। अक्सर कई तरह के सैंपल एक साथ या अलग-अलग जगहों से लिए जाते हैं। इस प्रकार की परीक्षा के लिए रेफरल जारी करने वाले डॉक्टर को रोगी को बायोमटेरियल की डिलीवरी की तैयारी के बारे में भी बताना चाहिए।
एंजाइम इम्यूनोएसे की तैयारी
एंजाइम इम्यूनोएसे के बाद प्राप्त आंकड़ों की सटीकता बढ़ाने के लिए, सामग्री के चयन की तैयारी निम्नानुसार होनी चाहिए:
- अध्ययन से 10 दिन पहले, एंटीबायोटिक्स, एंटीवायरल और एंटीमाइकोटिक दवाओं को छोड़ दें;
- एक दिन के लिए शराब, धूम्रपान और ड्रग्स लेने को बाहर करना आवश्यक है;
- उसी अवधि के दौरान, शारीरिक अतिरंजना से बचना आवश्यक है;
- रोगी द्वारा ली जाने वाली सभी दवाओं के प्रिस्क्राइबर को सूचित करें;
- यदि आप गर्भवती हैं या गर्भवती होने का संदेह है तो अपने डॉक्टर को सूचित करें।
यह सबसे अच्छा है अगर परीक्षण के लिए सामग्री का चयन सुबह खाली पेट किया जाए।
यदि निदान का उद्देश्य हार्मोनल पृष्ठभूमि की स्थिति निर्धारित करना है, तो पूर्व संध्या पर एक शांत स्थिति सुनिश्चित करना और तंत्रिका तनाव से बचना महत्वपूर्ण है। महिलाओं के लिए, हार्मोन के लिए रक्तदान मासिक चक्र की अवधि से स्पष्ट रूप से निर्धारित होता है, जिस पर नियुक्ति के समय डॉक्टर द्वारा चर्चा की जाएगी।
नमूना लेने से 2-3 दिन पहले, तले हुए और वसायुक्त खाद्य पदार्थों को मेनू से बाहर रखा जाना चाहिए, और साइट्रस फल और किसी भी अन्य नारंगी और पीले फलों और सब्जियों को हेपेटाइटिस परीक्षण से पहले नहीं खाना चाहिए।
एंजाइम इम्यूनोएसे के परिणामों की व्याख्या करना
एक गुणात्मक अध्ययन का परिणाम, एक नियम के रूप में, "+" (मिला) या "-" (नहीं मिला) संकेतों द्वारा दर्शाया गया है।
इम्युनोग्लोबुलिन के कुछ समूहों की उपस्थिति या अनुपस्थिति से, निम्नलिखित निष्कर्ष निकाले जा सकते हैं:
- JgM (-), JgG (-), JgA (-) - रोग प्रतिरोधक क्षमता पूरी तरह से अनुपस्थित है (शरीर ने पहले इस प्रकार के एंटीजन का सामना नहीं किया है);
- JgM (-), JgG (+), JgA (-) - पहले इस प्रतिजन या किसी टीके के साथ टकराव हुआ था;
- JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+) - तीव्र रोग प्रक्रिया (सबसे अधिक संभावना प्राथमिक);
- जेजीएम (-), जेजीजी (+/-), जेजीए (+/-) - क्रोनिक कोर्स;
- JgM (+), JgG (+), JgA (+) - रिलैप्स;
- JgM (-) - रिकवरी का चरण।
मात्रात्मक मूल्यों में एक बड़ा सूचना भार होता है, लेकिन केवल उपस्थित चिकित्सक पिछले संकेतों, रोगी की आयु और प्रत्येक विशिष्ट बीमारी के मानदंडों के आधार पर उनकी व्याख्या करने में सक्षम होते हैं। इस कारण से, अपने आप परिणामों का मूल्यांकन करना असंभव है।
कब तक रिजल्ट का इंतजार करें
इस तकनीक की कई किस्में हैं, जिसके आधार पर हाथ में डेटा प्राप्त करने की अवधि निर्धारित की जाती है। एलिसा डायग्नोस्टिक्स की औसत अवधि 4-6 घंटे है, जिससे अगले ही दिन परिणाम जारी करना संभव हो जाता है।
सबसे लंबे तरीकों में 10 दिन तक का समय लगता है, उदाहरण के लिए, एचआईवी संक्रमण का पता लगाने के मामले में।
तत्काल आवश्यकता के मामले में, एक्सप्रेस विधियों का उपयोग करना संभव है, जिसमें उत्तर 1-2 घंटे के भीतर प्राप्त होता है।
मुझे एलिसा परीक्षण कहां मिल सकता है?
चूंकि इस प्रकार के निदान के उपकरण काफी महंगे हैं, इसलिए सभी प्रयोगशालाएं इसे नहीं खरीद सकती हैं। इसके अलावा, विशिष्ट एंटीजन वाले परीक्षणों की सीमित शेल्फ लाइफ (आमतौर पर लगभग 1 वर्ष) होती है, इसलिए उन्हें लगातार अपडेट करने की आवश्यकता होती है।
इन्हीं कारणों से सरकार चिकित्सा संस्थानएलिसा प्रयोगशालाएं हमेशा उपलब्ध नहीं होती हैं। सबसे अधिक बार, आपको बड़े निजी चिकित्सा या बड़े नैदानिक केंद्रों से संपर्क करने की आवश्यकता होती है।
एलिसा अध्ययन करने के लिए, प्रयोगशाला के पास एक विशेष लाइसेंस होना चाहिए, और कर्मचारियों और प्रयोगशाला सहायकों को विशेष प्रशिक्षण से गुजरना होगा।
अक्सर, डॉक्टर द्वारा एक विशिष्ट निदान केंद्र या प्रयोगशाला की सिफारिश की जाती है जो रोगी को जांच के लिए निर्देशित करता है।
एंजाइम इम्यूनोएसे की कीमत
इस अध्ययन की कीमत देश के क्षेत्र और सेवा प्रदान करने वाले क्लिनिक के स्तर पर निर्भर करती है। मास्को में, एक प्रतिजन के निर्धारण के लिए न्यूनतम मूल्य 700 रूबल से शुरू होता है। यदि एक बार में कई इम्युनोग्लोबुलिन की पहचान करना आवश्यक है, तो कीमत को अभिव्यक्त किया जाएगा।
तत्काल विश्लेषण के मामले में, लागत 150-200 रूबल बढ़ जाती है। प्रत्येक प्रतिजन के लिए।
उच्च लागत के बावजूद, एंजाइम इम्यूनोएसे रोगी की जांच को यथासंभव सूचनात्मक और तेज़ बनाना संभव बनाता है, जो उपचार शुरू होने से पहले समय कम कर देता है और आपको व्यक्ति की स्थिति को जल्दी से स्थिर करने की अनुमति देता है।
यह वीडियो फिल्म "फंडामेंटल्स ऑफ एंजाइम इम्यूनोएसे" को दिखाता है।
विकास आधुनिक दवाईडायग्नोस्टिक्स की दुनिया में, यह कभी भी अपनी उपलब्धियों से विस्मित करना बंद नहीं करता है, और अब डॉक्टर को केवल अप्रत्यक्ष संकेतों पर भरोसा करते हुए संभावित निदान के बारे में धारणा बनाने की आवश्यकता नहीं है। एंजाइम से जुड़े इम्युनोसॉरबेंट परख (एलिसा) के प्रयोगशाला अध्ययन की दुनिया में निर्माण और परिचय आपको न केवल रोगज़नक़ की उपस्थिति, बल्कि रोग की कई अन्य विशेषताओं को भी जल्दी और सटीक रूप से निर्धारित करने की अनुमति देता है।
IFA के निर्माण और विकास का इतिहास
रक्त परीक्षण की इस पद्धति का उपयोग व्यावहारिक चिकित्सा में पिछली शताब्दी के मध्य में - कहीं 60 के दशक में किया जाने लगा। इसका प्रारंभिक लक्ष्य ऊतक विज्ञान के क्षेत्र में वैज्ञानिक अनुसंधान था, जो जैविक प्रजातियों के सेलुलर एंटीजेनिक संरचना की खोज और अध्ययन तक सीमित था। एक एलिसा रक्त परीक्षण एक एंजाइम द्वारा निर्धारित "एंटीजन-एंटीबॉडी" परिसर के गठन के साथ संबंधित एंटीजन (एजी) और विशिष्ट एंटीबॉडी (एटी) की बातचीत पर आधारित है।
इस घटना ने वैज्ञानिकों को यह निर्णय लेने के लिए प्रेरित किया कि विधि का उपयोग रक्त सीरम में बनने वाले विभिन्न वर्गों के प्रोटीन यौगिकों को पहचानने के लिए किया जा सकता है जब एक रोगज़नक़ शरीर में प्रवेश करता है। प्रतिरक्षा प्रणाली के कामकाज में उनकी प्रत्यक्ष भागीदारी के कारण, इन यौगिकों को इम्युनोग्लोबुलिन (आईजी, आईजी) कहा जाता था, और यह खोज प्रयोगशाला निदान में सबसे बड़ी सफलता थी।
साथ ही, यह अत्यधिक संवेदनशील विधि केवल 80 के दशक में सक्रिय रूप से उपयोग की जाने लगी, और यह केवल अत्यधिक विशिष्ट चिकित्सा संस्थानों में उपलब्ध थी। स्टेशनों और रक्त आधान केंद्रों, यौन और संक्रामक रोगों के अस्पतालों में सबसे पहले एंजाइम इम्यूनोएसे एनालाइज़र का उपयोग करने का अवसर मिला। यह "20 वीं सदी के प्लेग" - एड्स के तेजी से प्रसार के कारण था, और तत्काल नैदानिक और चिकित्सीय उपायों की आवश्यकता थी।
तकनीक की संभावनाएं
एलिसा रक्त परीक्षण का दायरा काफी विस्तृत है - फिलहाल यह कल्पना करना असंभव है कि कई बीमारियों के कारणों की खोज करना कितना मुश्किल होगा। इस तरह के एक अध्ययन का उपयोग अब लगभग सभी चिकित्सा शाखाओं में किया जाता है, यहाँ तक कि ऑन्कोलॉजी में भी। हालांकि बेख़बरों के लिए इसे समझना मुश्किल है, लेकिन कुछ मामलों में, इसका संचालन करने के बाद, प्रारंभिक अवस्था में ट्यूमर का पता लगाकर रोगियों की जान बचाना संभव था।
महत्वपूर्ण! एलिसा एक रक्त परीक्षण है जो मार्करों को कुछ घातक प्रक्रियाओं की विशेषता दिखाता है, जो आपको उस समय बीमारी का पता लगाने की अनुमति देता है जब यह किसी अन्य विधि के अधीन नहीं है।
आधुनिक निदान केंद्रों में, प्रयोगशाला परीक्षाओं को न केवल ट्यूमर मार्करों द्वारा दर्शाया जाता है - वे इस निदान के संचालन के लिए पैनलों के एक प्रभावशाली शस्त्रागार से सुसज्जित हैं। उनका उपयोग एक सेट को परिभाषित करने के लिए किया जा सकता है पैथोलॉजिकल स्थितियां, जैसे हार्मोनल असामान्यताएं और विभिन्न उत्पत्ति की संक्रामक प्रक्रियाएं।
इसके अलावा, एलिसा रक्त परीक्षण आयोजित करने और समझने से प्रभाव को ट्रैक करना संभव हो जाएगा चिकित्सा तैयारीएक बीमार व्यक्ति और एक जानवर के शरीर पर भी। उत्तरार्द्ध का व्यापक रूप से पशु चिकित्सा क्लीनिकों में उपयोग किया जाता है, जो हमारे पालतू जानवरों या ब्रेडविनर्स के स्वास्थ्य को बनाए रखने में मदद करता है, मांस, डेयरी उत्पादों और अंडों की स्थिर आपूर्ति प्रदान करता है, जो आहार में अपरिहार्य हैं।
इसलिए, केवल कुछ मिलीलीटर शिरापरक रक्त लेने और एलिसा पद्धति का उपयोग करके इसका निदान करने के परिणामस्वरूप, डॉक्टर, अनुसंधान सामग्री का वर्णन करने के बाद, यह निर्धारित करने में सक्षम होंगे:
- हार्मोनल अवस्था, जिसमें सेक्स और थायरॉयड ग्रंथियों के जैविक रूप से सक्रिय पदार्थ, साथ ही अधिवृक्क ग्रंथियां शामिल हैं;
- बैक्टीरिया की उपस्थिति और विषाणुजनित संक्रमण(हेपेटाइटिस बी और सी, सिफलिस, दाद, क्लैमाइडिया, तपेदिक, माइको- और यूरियाप्लाज्मोसिस, एचआईवी, टोर्च) और इस प्रकृति के अन्य रोग;
- रोग प्रक्रिया के रोगजनकों की महत्वपूर्ण गतिविधि के संकेत, जो वसूली में समाप्त हो गए और एंटीबॉडी (प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया) के गठन के चरण में पारित हो गए।
ऐसे परिसरों को प्रतिरक्षा कोशिकाओं द्वारा पहचानना और समाप्त करना बहुत आसान है। कई मामलों में एंटीबॉडी के रूप में अवशिष्ट प्रभाव जीवन के लिए रक्त में निहित होते हैं, जो व्यावहारिक रूप से पुन: संक्रमण के जोखिम को शून्य तक कम कर देता है।
इम्युनोग्लोबुलिन की किस्में
कई प्रकार के एंटीबॉडी हैं, और उनमें से प्रत्येक एक निश्चित चरण में प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया की प्रक्रिया में शामिल है। उदाहरण के लिए, क्लास एम इम्युनोग्लोबुलिन (IgM) शरीर में एंटीजन के अंतर्ग्रहण की प्रतिक्रिया में सबसे पहले बनता है। रोग के पहले दिनों में उनकी उच्चतम दर देखी जाती है।
एलिसा में प्रयुक्त इम्युनोग्लोबुलिन के प्रकार
प्रतिरक्षा प्रणाली तब प्लाज्मा में क्लास जी आईजी (आईजीजी) लॉन्च करती है, जो एंटीजन के पूर्ण विनाश और रोगी की वसूली के लिए जिम्मेदार होते हैं। बाद में, वे रक्त में बने रहते हैं, जिससे एक समान रोगज़नक़ के पुन: प्रवेश के लिए प्रतिरक्षा प्रणाली तैयार होती है। इस तरह टीकाकरण काम करता है। पैथोलॉजिकल सूक्ष्मजीवों के कमजोर प्रतिजनों की शुरूआत के साथ, कई इम्युनोग्लोबुलिन प्लाज्मा में दिखाई देते हैं और घूमते रहते हैं।
प्रयोगशाला निदान के लिए रुचि की मुख्य वस्तुएं Ig वर्ग M, G और A हैं। उनकी एकाग्रता के स्तर से, आप रोग की अवस्था निर्धारित कर सकते हैं और पता लगा सकते हैं कि किसी व्यक्ति को अपने जीवन में कौन से संक्रामक रोग हुए हैं। उदाहरण के लिए, आप देख सकते हैं कि क्या कोई इतिहास था छोटी माताया रूबेला। यह पता लगाने के लिए कि रोगी के शरीर में एक निश्चित प्रकार का एटी या एएच मौजूद है या किसी हार्मोन की एकाग्रता, डॉक्टर को कई प्रयोगशाला परीक्षणों को निर्धारित करने की आवश्यकता नहीं है - यह एलिसा के लिए एक रेफरल लिखने के लिए पर्याप्त है।
तकनीक का सार
अनुसंधान पद्धति कार्यों के कई विकल्पों (प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष - प्रतिस्पर्धी और गैर-प्रतिस्पर्धी) पर आधारित है, जिनमें से प्रत्येक को विशिष्ट उद्देश्यों के लिए डिज़ाइन किया गया है। यह दृष्टिकोण आपको एक विशिष्ट विकृति के कारण की पहचान करने के लिए कम से कम समय में एक लक्षित खोज करने की अनुमति देता है। विभिन्न वर्ग श्रेणियों के Ig का पता लगाने के लिए, एक 96-वेल प्लेट (पॉलीस्टाइरीन पैनल) का उपयोग किया जाता है, और adsorbed पुनः संयोजक प्रोटीन इसके कुओं में स्थित होते हैं। वे प्रतिजनों की भूमिका निभाते हैं, और प्रारंभिक अवस्था में ठोस चरण में होते हैं।
जब वे रक्त प्लाज्मा के साथ कुएं में प्रवेश करते हैं, एंटीजन या एंटीबॉडी उनके अभिविन्यास के संबंध में वस्तु की पहचान करते हैं, और एक जटिल (एजी-एटी) बनाते हैं। यह गठन एक एंजाइम यौगिक (संयुग्म) द्वारा तय किया जाता है, जो बाद में कुएं के परिवर्तित धुंधलापन के रूप में प्रकट होता है। एलिसा का उत्पादन विशिष्ट प्रयोगशालाओं में निर्मित विशिष्ट परीक्षण प्रणालियों पर किया जाता है और अभिकर्मकों के पूर्ण सेट से सुसज्जित होता है।
यह विश्लेषण वाशर और रीडआउट स्पेक्ट्रोमीटर पर किया जा सकता है, लेकिन उन्हें शारीरिक श्रम की आवश्यकता होती है। बेशक, प्रयोगशाला सहायक के लिए पूरी तरह से स्वचालित उपकरणों पर सभी जोड़तोड़ करने के लिए यह कई गुना अधिक सुविधाजनक और तेज़ है। उनका उपयोग करते समय, प्रयोगशाला कर्मचारियों को बड़ी मात्रा में नीरस गतिविधि से राहत मिलती है - धुलाई, टपकाना और बाकी की दिनचर्या, लेकिन सभी नहीं चिकित्सा संस्थानइतने महंगे उपकरण वहन कर सकते हैं
इसलिए, कई अस्पताल और डायग्नोस्टिक संस्थान पुराने तरीके से - अर्ध-स्वचालित उपकरणों पर एलिसा को जारी रखते हैं।
अनुसंधान सामग्री की व्याख्या विशेष रूप से प्रयोगशाला निदान में एक विशेषज्ञ की क्षमता है - केवल उन्हें रोग के पाठ्यक्रम की बारीकियों और सूक्ष्मताओं के बारे में परिणाम बताया जा सकता है। इस मामले में, डॉक्टर को गलत नकारात्मक या गलत सकारात्मक उत्तर प्राप्त करने की संभावना को ध्यान में रखना चाहिए।
सामग्री का प्रतिलेखन
उच्च-गुणवत्ता वाले एंजाइम इम्यूनोएसे का परिणाम एक स्पष्ट निष्कर्ष होना चाहिए - इस रक्त के नमूने में वांछित सूक्ष्मजीव पाया गया या नहीं। मात्रात्मक विश्लेषण एकाग्रता के स्तर को इंगित करेगा और इसे दो तरीकों से व्यक्त किया जा सकता है - संख्याओं में मान या "+" संकेतों की संख्या।
विश्लेषण किए गए संकेतक
शोध के दौरान, प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया में शामिल मुख्य इम्युनोग्लोबुलिन का गहन अध्ययन किया जाता है, जैसे:
- आईजीएम - इस वर्ग का पता लगाने का अर्थ है एक संक्रामक रोग के तीव्र रूप का विकास। आईजीएम की खोज में एक नकारात्मक परिणाम दोनों वांछित रोगज़नक़ की अनुपस्थिति और रोग के एक पुराने पाठ्यक्रम में संक्रमण का प्रमाण हो सकता है।
- आईजीए - ज्यादातर मामलों में आईजीएम की अनुपस्थिति में इस वर्ग की परिभाषा, पुरानी या का संकेत अव्यक्त रूपएक संक्रामक रोग का विकास।
- IgM और IgA (एक साथ उपस्थिति) - दोनों प्रकारों के लिए सकारात्मक परिणाम पैथोलॉजी के तीव्र रूप के चरम शिखर का संकेत देते हैं।
- आईजीजी - इसकी उपस्थिति रोग के एक जीर्ण रूप में परिवर्तन या पुनर्प्राप्ति और निर्धारित होने वाले एजेंट के लिए प्रतिरक्षा के गठन को इंगित करती है।
आईजी के एक निश्चित वर्ग की उपस्थिति और संचय अलग-अलग समय चरणों में होता है। इसलिए, उदाहरण के लिए, आईजीएम रोगज़नक़ के हिट होने के लगभग 5 दिनों के बाद पहले दिखाई देता है। IG लगभग 5-6 सप्ताह तक रक्त में रहते हैं, और फिर धीरे-धीरे गायब हो जाते हैं। इस समय, वे एलिसा द्वारा निर्धारण के लिए उपलब्ध हैं। रोग की शुरुआत के लगभग 3-4 सप्ताह बाद, आईजीजी प्रकट होता है, जो बाद में कई महीनों तक रह सकता है। लेकिन विश्लेषण में उनका पता लगाना हमेशा संभव नहीं होता है।
IgA 2-4 सप्ताह की अवधि में रक्त में बनते हैं, जबकि उनमें से 20% सीरम में और 80% श्लेष्म झिल्ली के रहस्य में निहित होते हैं। एक नियम के रूप में, ये इम्युनोग्लोबुलिन 2-9 सप्ताह के भीतर गायब हो जाते हैं, जो रोगज़नक़ के विनाश और रोगी के ठीक होने का संकेत देता है। यदि एलिसा अभी भी आईजीए की उपस्थिति दिखाती है, तो यह प्रक्रिया के जीर्ण रूप में संक्रमण का संकेत देती है।
विश्लेषण परिणाम विकल्प
प्राप्त आंकड़ों के आधार पर, एलिसा प्रतिक्रियाओं को सभी एटी और एजी की पूरी सूची और सकारात्मक या नकारात्मक प्रतिक्रिया के संकेत के साथ तालिका के रूप में जारी किया जा सकता है। कुछ स्थितियों में, एक मात्रात्मक मूल्य प्रदर्शित किया जाएगा - एक तीव्र सकारात्मक, सकारात्मक, कमजोर सकारात्मक या नकारात्मक परिणाम। दूसरा विकल्प अध्ययन किए गए रक्त के नमूने में निहित एंटीबॉडी की मात्रा को इंगित करता है।
एलिसा सामग्री की व्याख्या के वेरिएंट
उपरोक्त मूल्यों के अलावा, एलिसा की प्रक्रिया में, एक अन्य मात्रात्मक पैरामीटर का अध्ययन किया जाता है - प्रतिशत के रूप में गणना की जाने वाली एटी एविडिटी इंडेक्स। यह दिखाता है कि रोग कितने समय तक रहता है - अर्थात, जितना अधिक संकेतक होता है, उतना ही अधिक समय तक पैथोलॉजी विकसित होती है।
वैकल्पिक एलिसा विधि
एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख एक काफी प्रसिद्ध और सामान्य निदान है। शायद कुछ लोगों ने इसके बारे में कभी नहीं सुना होगा, लेकिन लोगों की एक विस्तृत श्रृंखला के लिए एक और भी कम ज्ञात विविधता है। ये अध्ययनजिसमें एक गैर-रक्त का नमूना लिया जाता है। इस तकनीक को फेकल गुप्त रक्त परीक्षण कहा जाता है, और कई मामलों में यह अतिरिक्त दुर्बल करने वाली प्रक्रियाओं से बचा जाता है, जो कि अप्रिय संवेदनाएँ.
मनोगत रक्त (हीमोग्लोबिन अणु) के लिए एलिसा विश्लेषण अंग रक्तस्राव का पता लगाना संभव बनाता है पाचन तंत्रयहां तक कि नगण्य, जिसके लक्षण रोगी के मल में, जैसा कि वे कहते हैं, नग्न आंखों से नहीं पाया जा सकता है। मानव मल में गुप्त रक्त का एलिसा विश्लेषण छोटी अवधिदिखाने में सक्षम पेप्टिक छाला, पॉलीपोसिस, डायवर्टीकुलोसिस, ट्यूमर जो शुरुआती चरणों में कुछ लक्षणों के साथ नहीं होते हैं।
आज तक, हजारों किस्मों के एंजाइम इम्यूनोएसे डायग्नोस्टिक टेस्ट सिस्टम बनाए गए हैं, जो पैथोलॉजी की एक विशाल सूची से एटी और एजी को खोजने की क्षमता प्रदान करते हैं। इसलिए, इस विश्लेषण का उपयोग चिकित्सा की लगभग सभी शाखाओं में, किसी भी आयु वर्ग के लिए किया जाता है। और पूर्ण हानिरहितता आपको गर्भावस्था के दौरान और कमजोर रोगियों के निदान के लिए इसका सहारा लेने की अनुमति देती है।
(एलिसा) प्रयोगशाला में रक्त परीक्षण की एक विधि है, जो विशेष कोशिकाओं - विभिन्न रोगों के लिए एंटीबॉडी की खोज पर आधारित है। विधि न केवल रोगज़नक़ की पहचान करने की अनुमति देती है, बल्कि यह भी स्थापित करती है कि रोग प्रक्रिया किस स्तर पर है। उत्तरार्द्ध रोग का निदान और रोगी के आगे के उपचार के लिए बहुत महत्वपूर्ण है।
विधि के फायदे और नुकसान
इन सब में आधुनिक तरीकेडायग्नोस्टिक एलिसा सबसे नवीन और तकनीकी रूप से सटीक है। इसके मुख्य लाभ हैं:
- रोगी के रक्त में संक्रामक रोगों के सभी मौजूदा एंटीबॉडी की खोज करने की क्षमता।
- अनुसंधान पद्धति की उच्च उपलब्धता। आज, एलिसा विश्लेषण किसी भी मध्यम आकार की प्रयोगशाला द्वारा किया जा सकता है।
- विधि की लगभग 100% विशिष्टता और संवेदनशीलता।
- एंटीबॉडी और एंटीजन की खोज करने की क्षमता, साथ ही रोग प्रक्रिया के चरण की स्थापना और इसकी गतिशीलता को ट्रैक करना, संख्या की तुलना के लिए धन्यवाद।
अन्य परीक्षणों की तुलना में इस तरह के कई फायदे पूरी तरह से विश्लेषण की एक और एकमात्र खामी को खत्म कर देते हैं: यह एंटीबॉडी का पता लगाने में सक्षम है, लेकिन स्वयं रोगज़नक़ का नहीं।
विश्लेषण के मूल्यांकन के लिए बुनियादी शर्तें
यह समझने के लिए कि एलिसा विश्लेषण क्या है, यह क्या है और इसे कैसे किया जाता है, आपको विशेषज्ञों द्वारा उपयोग की जाने वाली मूल शर्तों से परिचित होने की आवश्यकता है।
- एंटीबॉडी- एक प्रोटीन जो मानव प्रतिरक्षा प्रणाली (टाइप बी लिम्फोसाइट्स) की कोशिकाओं द्वारा निर्मित होता है। वे एक विदेशी एजेंट या पदार्थ के अंतर्ग्रहण के लिए एक विशिष्ट प्रतिक्रिया के साथ प्रतिक्रिया करते हैं। एंटीबॉडी का दूसरा नाम इम्युनोग्लोबुलिन है, वे विभिन्न वर्गों से संबंधित हैं: ए, ई, एम, जी। वे द्रव्यमान, प्रतिक्रिया की गति, आधा जीवन और कई अन्य विशेषताओं में एक दूसरे से भिन्न होते हैं। आम तौर पर, मानव रक्त में मुख्य रूप से वर्ग जी इम्युनोग्लोबुलिन होते हैं। यदि कोई संक्रमण होता है, तो इम्युनोग्लोबुलिन ए और एम की मात्रा तेजी से बढ़ जाती है। इम्युनोग्लोबुलिन ई एलर्जी प्रतिक्रियाओं में शामिल होते हैं।
- एंटीजन- कार्बनिक मूल और उच्च आणविक भार का एक विदेशी एजेंट। बहुधा ये रोगजनक या उनके जैविक रूप से सक्रिय पदार्थ होते हैं।
- एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स, या प्रतिरक्षा परिसर, सीधे एक विदेशी पदार्थ और एक इम्युनोग्लोबुलिन का संयोजन होता है, जो एक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया को जन्म देता है।
विधि का सार और दायरा
मरीजों के पास अक्सर एक प्रश्न होता है: एलिसा विश्लेषण, यह क्या है, यह कैसे किया जाता है और यह किस लिए है? आप इसके चरणों का संक्षेप में वर्णन करके विधि के बारे में सुलभ तरीके से बात कर सकते हैं।
तैयारी का चरण. लैब डॉक्टर 96 कुओं के साथ एक विशेष प्लेट का उपयोग करता है। प्रत्येक कुएं की सतह पर एक विशिष्ट रोगज़नक़ का एक प्रतिजन लगाया जाता है।
प्रथम चरणरक्त लिया जाता है, जिसे फिर बूंद-बूंद करके कुएं में डाला जाता है। कुआं रक्त में एंटीजन और एंटीबॉडी के बीच प्रतिक्रिया शुरू करता है।
चरण 2कुएं में, प्रतिरक्षा परिसरों के गठन के साथ प्रतिक्रिया जोरों पर है। नतीजतन, एक निश्चित रंग का पदार्थ बनता है। रंग की तीव्रता प्रत्येक विशिष्ट रोगज़नक़ के लिए रोगी के रक्त में एंटीबॉडी की मात्रा पर निर्भर करती है।
स्टेज 3फोटोमेट्री द्वारा परिणाम का मूल्यांकन। इसके लिए स्पेक्ट्रोफोटोमीटर नामक एक विशेष उपकरण का उपयोग किया जाता है। यह कुएं और नियंत्रण नमूने में सामग्री के घनत्व की तुलना करता है। इसके अलावा, डिवाइस गणितीय विश्लेषण द्वारा परिणाम उत्पन्न करता है।
एलिसा के परिणामों और उद्देश्य का मूल्यांकन
परिणाम की व्याख्या कई महत्वपूर्ण बारीकियों पर निर्भर करती है:
- कुएं का ऑप्टिकल घनत्व।
- खैर प्लेट निर्माता (परीक्षण प्रणाली)।
- प्रयोगशाला जहां अध्ययन किया गया था।
इन बारीकियों को देखते हुए, आपको कभी भी अलग-अलग परीक्षण प्रणालियों या अलग-अलग प्रयोगशालाओं के दो परिणामों की तुलना नहीं करनी चाहिए।
एक अन्य महत्वपूर्ण बिंदु जो एलिसा के विश्लेषण को प्रभावित करता है, वह एंटीबॉडी की तथाकथित अम्लता है। यह पैरामीटर एंटीजन की मात्रा, एंटीजन-एंटीबॉडी परिसर में बंधन की ताकत को दर्शाता है। इसकी परिभाषा प्रोटीन संरचनाओं को हल करने के लिए यूरिया के साथ प्रतिरक्षा जटिल के उपचार पर आधारित है। यह आपको एंटीजन और एंटीबॉडी के बीच कमजोर बंधनों को नष्ट करने और केवल मजबूत लोगों को छोड़ने की अनुमति देता है। उत्सुकता के लिए अध्ययन का महत्व इस तथ्य में निहित है कि इसका उपयोग संक्रमण की अवधि का पता लगाने के लिए किया जा सकता है। गर्भवती महिलाओं के निदान के लिए यह जानकारी अत्यंत महत्वपूर्ण है।
एक एलिसा रक्त परीक्षण निम्न कार्य करता है:
- रोगजनकों के विभिन्न प्रतिजनों की खोज करने के लिए।
- हार्मोनल पृष्ठभूमि का अध्ययन करने के लिए।
- एक स्व-प्रतिरक्षित बीमारी की उपस्थिति के लिए परीक्षण करने के लिए।
- मार्करों का पता लगाने के लिए ऑन्कोलॉजिकल रोग.
एलिसा की किस्में
एलिसा विश्लेषण की निम्नलिखित किस्में हैं:
- अप्रत्यक्ष।
- सीधा।
- प्रतिस्पर्द्धी।
- अवरोधक विधि।
लेकिन वास्तव में, आज केवल एलिसा (एंजाइम लिंक्ड इम्यूनोसॉर्बेंट एसे) नामक एक विधि का उपयोग किया जाता है। यह कुएं की सतह पर रंग परिवर्तन के साथ एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स के गठन की उपरोक्त वर्णित प्रतिक्रिया पर आधारित है।
प्रत्यक्ष मात्रात्मक एलिसा रक्त परीक्षण विशेष ध्यान देने योग्य है। यह एक प्रकार का विश्लेषण नहीं है, बल्कि परिणामों के मूल्यांकन का एक तरीका है। उसके लिए धन्यवाद, एंटीबॉडी की संख्या की गणना की जाती है और उनकी कक्षाएं निर्धारित की जाती हैं। परिणाम नमूने के ऑप्टिकल घनत्व पर निर्भर करता है, परीक्षण प्रणाली जिस पर एलिसा प्रदर्शन किया गया था, और प्रयोगशाला पर भी।
एलिसा द्वारा पता लगाए गए रोग
एलिसा एक रक्त परीक्षण है जो आपको बड़ी संख्या में विभिन्न संक्रामक रोगों की पहचान करने की अनुमति देता है। इसके अलावा, वायरल और दोनों जीवाणु रोग. उदाहरण के लिए, प्रतिरक्षा परिसरों के गठन की सहायता से, निम्नलिखित रोगों के प्रेरक एजेंटों के प्रतिजनों की उपस्थिति को साबित करना संभव है:
इसके अलावा, एलिसा आपको पता लगाने की अनुमति देता है:
- कैंसर मार्कर - TNF (ट्यूमर नेक्रोसिस फैक्टर), PSA (प्रोस्टेट-विशिष्ट एंटीजन), CEA (कैंसर-भ्रूण एंटीजन), CA-125 (डिम्बग्रंथि ट्यूमर मार्कर)
- गर्भावस्था हार्मोन एचसीजी (मानव कोरियोनिक गोनाडोट्रोपिन) है।
- प्रजनन प्रणाली विकार: महिला और पुरुष प्रजनन प्रणाली के हार्मोन।
- थायरॉयड ग्रंथि की पैथोलॉजी।
यह उल्लेख करना महत्वपूर्ण है कि एचआईवी के लिए एलिसा परीक्षण आज इस खतरनाक बीमारी का निदान करने का मुख्य तरीका है।
एलिसा सामग्री और नमूनाकरण तकनीक
एलिसा करने के लिए मरीज का खून खाली पेट लिया जाता है। इसके अलावा, रक्त से सीरम प्राप्त किया जाता है, जिसका उपयोग सीधे विश्लेषण के लिए किया जाता है। इसके अलावा, एलिसा पर प्रदर्शन किया जा सकता है मस्तिष्कमेरु द्रव(सेरेब्रोस्पाइनल तरल पदार्थ), गर्भाशय ग्रीवा नहर (गर्भाशय ग्रीवा) का बलगम, एमनियोटिक द्रव और यहां तक कि कांच का द्रव (नेत्रगोलक)।
रक्तदान करने से पहले, रोगी को चेतावनी दी जाती है कि उसे कोई दवा नहीं लेनी चाहिए, और एंटीबायोटिक दवाओं के साथ इलाज करना चाहिए एंटीवायरल ड्रग्सरक्त के नमूने लेने से कम से कम दो सप्ताह पहले समाप्त करने की सिफारिश की जाती है।
परिणामों की प्राप्ति और व्याख्या की शर्तें
प्रयोगशाला से प्रतिक्रिया प्राप्त करने का समय उसके काम की गति पर निर्भर नहीं करता है, बल्कि रोग के चरण पर और रक्त में पहले से ही कौन से एंटीबॉडी दिखाई दे चुके हैं। इसलिए, उदाहरण के लिए: इम्युनोग्लोबुलिन एम विश्लेषण के लिए रक्त लेने के लगभग 2 सप्ताह बाद दिखाई देता है और इसका मतलब है कि यह प्रक्रिया प्राथमिक संक्रमण के स्तर पर है या पुरानी बीमारी का प्रकोप हुआ है। इसी समय, प्राथमिक संक्रमण के दौरान वर्ग एम और जी के एंटीबॉडी दिखाई देते हैं। इसके अलावा, बाद वाले का पता 4 सप्ताह के बाद लगाया जा सकता है।
IgA 2-3 सप्ताह के बाद या तो अकेले या M के साथ दिखाई देता है, जिसका अर्थ है मामूली संक्रमण, या जी के साथ मिलकर, एक पुरानी प्रक्रिया का संकेत देता है।
रक्त में एंटीबॉडी की उपस्थिति के लिए इस तरह के अलग-अलग शब्द रोगी को परिणाम के लिए लंबे समय तक प्रतीक्षा करेंगे। एलिसा विश्लेषण किए जाने के बाद एक महीने से अधिक प्रतीक्षा करना स्वीकार्य है। डॉक्टर द्वारा डिकोडिंग और इंटरप्रिटेशन में भी एक निश्चित समय लगता है।
